PCR

                                                    6. La PCR

 

consiste à amplifier sélectivement une séquence particulière d’ADN par l’action répétée d’une ADN polymérase.

Le fragment d’ADN à amplifier est compris  entre deux séquences (complémentaires des amorces) qui doivent être connues et la longueur ne peut excéder 10 kb.

La réaction de la PCR comporte trois étapes qui constituent un cycle au cours duquel la quantité d’ADN à amplifier est doublée.

Ces cycles sont renouvelés entre 20 et 50 fois en fonction de la quantité d’ADN cible de départ et du but recherché.

 la dénaturation de l’ADN à amplifier à 94°C,

l’hybridation avec une amorce, appariement primer, à 64°C

L’extension de l’amorce à 70 - 72°C par la Taq polymérase.

L’amplification est effectuée par la répétition des cycles qui assure une duplication exponentielle de chaque brin.